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【瑞士步琦】当你浓缩多肽与蛋白质时你会是“旋转蒸发党”还是“冷冻干燥党”呢?

时间: 2024-03-08 08:19:11 |   作者: 冷库设备

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  蛋白质在几乎所有细胞的基本过程中起着及其重要的作用,其中大部分信息都被编码在核酸中,并由蛋白质控制。蛋白质由称为氨基酸的组成单元构成。在溶液中,蛋白质形成高度有序的三维结构,这与它们的生物功能紧密关联。肽是蛋白质的较小版本,因为它们包含较少的氨基酸。尽管肽的三维结构比蛋白质的结构相对比较简单,但其生物重要性并不少于蛋白质。

  通过上述的对比,再结合常见的处理步骤,我们很容易能找到比较合适我们多肽或蛋白质样品的浓缩方法。

  旋转蒸发仪在浓缩和干燥时间上有很明显的优势,常规实验量的反应液(1L以内),在旋转蒸发仪上可以在1小时以内处理完毕。除此之外,旋转蒸发仪免去了冷冻干燥的预冻步骤,可直接上机处理,这进一步加快了处理效率。

  :相对于旋转蒸发仪,冷冻干燥机在应用面上会显得狭窄很多。但其干燥样品的程度,特别是针对含水量较高的样品,冷冻干燥具有绝对的优势,这有助于后续的处理。因此在针对多肽和蛋白类化合物时,我们大家可以根据不同的步骤采取多种干燥手段。在纯化分离前,往往有大量的液体样品需要浓缩,才可能正真的保证样品不在分离柱内扩散,获得较好的峰型,这时我们大家可以采用旋转蒸发仪来处理。而在纯化分离完毕后,我们会获得高纯度的少量液体样品,此时我们就能够使用冷冻干燥来处理。

  温度条件对于多肽和蛋白质类的样品至关重要,很多此类样品无法承受过多的热应力。针对这类样品,冷冻干燥机是最适合的选择,其室温的处理条件可以完全杜绝样品变性或分解的可能性。

  蛋白类样品在蒸发过程中极易起泡,为了避免样品暴沸,我们能够使用防暴沸传感器或者E型冷凝器。

  E型冷凝器在冷凝器前连接了一个缓冲空腔,可以有很大成效避免样品暴沸进入蒸发瓶内。

  在干燥样品的过程中,样品容易附着在蒸发烧瓶上,特别是蛋白类的粘性样品。为避免这样的一种情况发生,能够正常的使用干燥型蒸发烧瓶。干燥蒸发烧瓶上有凸起的部分,能够大大减少粉末在玻璃壁上的堆积,配合 R-300 的正反转干燥模式,能更加进一步避免样品凝结。

  多肽和蛋白质的干燥速率通常取决于表面积与样品体积之比。表面积越大,样品干燥越快,因为更多的水分子可以离开基质。为增加样品在预冻过程中的比表面积,建议使用 R-300 的杜瓦罐套件,可同时实现高效预冻和高比表面积。

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